啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响。请回答：

啤酒酵母是啤酒工业发酵菌种，对啤酒的品质、风味有很大影响。请回答：

（1）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入___，发酵生产 转基因酵母乙肝疫苗。在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，共有 __（A．1 个 B．2 个 C．3个D．4 个）粘性末端。将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选，这是因为___。该转基因技术实践应用的成功标志是 __。

（2）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用。人们将经过基因改造的胚胎干细胞核与 __融合，得到___，并促使其在体外分裂发育成 __，再通过胚胎移植获得后代。目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法，其原因是 __。

（3）胚胎干细胞具有重要的生产和临床医学价值。在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为 __，其作用是 __。

【答案】

啤酒酵母（受体细胞或宿主细胞） D 不是所有细胞都接纳重组质粒 成功表达乙肝病毒表面抗原 去核卵细胞 重组（卵）细胞 早期胚胎（囊胚） 胚胎发育不同时期所需营养条件不同；目前尚无全体外胚胎培养技术 饲养层 促进干细胞生长，抑制干细胞分化

【解析】

基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达；从分子水平上检测目的基因的方法：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。

（1）科研人员将表达乙肝病毒表面抗原的基因构建在重组质粒中，进而转入受体细胞（啤酒酵母细胞），发酵生产转基因酵母乙肝疫苗。在构建重组质粒过程中，通过同种限制性核酸内切酶（-G↓AATTC-）切割得到的一个目的基因和一个开环质粒，目的基因和开环质粒上分别具有两个粘性末端，即共有4个粘性末端；由于不是所有受体细胞都接纳了重组质粒，需要将重组质粒导入受体细胞的操作步骤完成以后，需要对所有受体细胞进行筛选；该转基因技术实践应用的成功标志是成功表达乙肝病毒表面抗原。

（2）转基因技术结合胚胎工程在高等动物育种中也有成熟应用。人们将经过基因改造的胚胎干细胞与去核卵细胞融合，得到重组（卵）细胞/重建“合子”，并促使其在体外分裂发育成早期囊胚/早期胚胎，再通过胚胎移植获得后代；由于胚胎发育不同时期需要不同培养条件，并且目前尚无全体外胚胎培养技术，因此目前胚胎移植是胚胎工程中获得后代的唯一方法。

（3）在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为饲养层，其作用是促进干细胞生长、抑制干细胞分化。