人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有_____________、______________和_______________。

（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________旁进行操作。接种后的培养皿_______于37℃的____________中培养。

（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于_______培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的________使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力________。

（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )。

A．多

B．少

C．相等

D．几乎为零

【答案】

（1）高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌

（2）酒精灯火焰旁 倒置 恒温培养箱（2分）

（3）鉴别（2分） 氨（2分） 越强（2分）

（4）B（2分）

【解析】

（1）培养基常用的灭菌方法为高压蒸汽灭菌，为彻底灭菌。

（2）稀释土壤溶液的过程每一步都要在酒精灯火焰旁进行操作，消灭其他微生物。接种后的培养皿倒置于37℃的恒温培养箱中培养，倒置是防止水蒸气在培养皿盖凝结，恒温37℃保证繁殖适宜温度。

（3）具有筛选微生物功能的培养基为选择培养基。尿素被分解产生的氨使pH升高，酚红指示剂变红。变色区域越大，表明该菌株分解尿素生成的氨越多，利用尿素的能力越强。

（4）只有部分细菌会分解尿素，故以尿素为氮源的培养基中菌落数少。