双链DNA分子复制时,以解开的两条单链为模板合成子链,新合成的每个DNA分子都保留原来DNA分子中的一条链的复制方式称为半保留复制。请用同位素标记法和密度梯度离心法设计实验,证明DNA分子的复制是以半

所属学校:学历教育 科目:高中生物 2024-08-06 10:38:22 高中生物

双链DNA分子复制时,以解开的两条单链为模板合成子链,新合成的每个DNA分子都保留原来DNA分子中的一条链的复制方式称为半保留复制。请用同位素标记法和密度梯度离心法设计实验,证明DNA分子的复制是以半保留的方式进行的。

实验材料:含15N标记的NH4C1培养液、含14N的NH4C1培养液、大肠杆菌(20min分裂一次)、离心管、锥形瓶等。

(1)请简要写出本实验的步骤_________。

(2)预测实验结果并进行简要分析__________。

(3)本实验的结论是___________________。

【答案】

实验步骤:用含15N标记的NH4Cl培养液培养大肠杆菌,让其DNA双链都带上15N,作为亲代;再将大肠杆菌转移到含14N的NH4Cl培养液中;分别提取亲代、20 min和40 min后的大肠杆菌的DNA,并将DNA进行密度梯度离心,记录离心管中DNA的位置预测实验结果及分析:l5N标记的亲代大肠杆菌的双链DNA密度最大,最靠近离心管底部(重带);20 min后的大肠杆菌双链DNA的密度居中,在离心管的位置居中(中带);40 min后的大肠杆菌双链DNA,1/2的密度最小,在离心管的位置离底部最远(轻带),1/2的密度居中,在离心管的位置居中(中带)DNA分子的复制是以半保留方式进行的

【解析】

根据题干信息分析,该实验的目的是用同位素标记法和密度梯度离心法设计实验,证明DNA分子的复制是以半保留的方式进行的;正常大肠杆菌的DNA是没有放射性的,可以用含15N的原料对其双链进行标记,然后放到没有放射性的原料中复制一次、两次等,然后离心通过观察子代在试管中的位置进行分析。

(1)根据以上分析结合实验设计的一般原则进行实验设计:用含15N标记的NH4Cl培养液培养大肠杆菌,让其DNA双链都带上15N作为亲代;再将大肠杆菌转移到含14N的NH4Cl培养液中;分别提取亲代、20 min和40 min后的大肠杆菌的DNA,并将DNA进行密度梯度离心,记录离心管中DNA的位置。

(2)根据实验过程预测实验结果及分析:l5N标记的亲代大肠杆菌的双链DNA密度最大,最靠近离心管底部(重带);20 min后的大肠杆菌相当于DNA复制了一次,每一个DNA含有一条l5N的链和一条l4N的链,即双链DNA的密度居中,在离心管的位置居中(中带);40 min后的大肠杆菌相当于DNA复制了两次,双链DNA1/2的密度最小(只含有l4N),在离心管的位置离底部最远(轻带),1/2的密度居中(含有一条l5N的链和一条l4N的链),在离心管的位置居中(中带)。

(3)根据以上分析可知,该实验的结论是:DNA分子的复制是以半保留方式进行的。

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