多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术;电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上,并加上直流电场,可利用分子带电荷不同分离和分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。请回答有关这两项技术的

所属学校:学历教育 科目:高中生物 2024-08-04 09:32:09 高中生物

多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术;电泳技术是将待测样品放在光滑的凝胶薄膜上,并加上直流电场,可利用分子带电荷不同分离和分析氨基酸和多核苷酸片段等有机物。请回答有关这两项技术的原理及应用问题。

(1)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离出__________,它的发现解决了酶重复使用的难题,使链式反应成为可能。PCR的每次循环可以分为_____________________三步;要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基为_________培养基(按功能分) 。

(2)电泳技术原理:在同一电场下,由于蛋白质或DNA的________以及本身大小、形状不同而产生不同的迁移方向或速度,从而实现样品的分离。在电泳过程中,带电分子会向着与其所带电荷________( 填“相同”或 “相反” )的电极移动。

如下图为应用电泳方法和原理对核酸进行分析,请据图分析回答有关问题。

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(3)上图中被分析的材料应属于一条___________链。如果选择性断开的位置是碱基G,那么随机出现的被标记片段应有________种。在电泳带上被分离的显示位置应有________处。

(4)应用上述原理分析了某种未知序列核酸的一条单链,结果如下图所示,此结果说明,该核酸的此单链含________个核苷酸,其A∶T∶G∶C=________。

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【答案】

耐高温的DNA聚合酶(或Taq酶) 变性、复性和延伸 选择 带电性质 相反 DNA(单) 4 4 18 5∶4∶5∶4

【解析】

试题PCR技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,包括变性、复性和延伸三个步骤,变性是利用高温使DNA解旋;复性是在较低温度下,两种引物和DNA单链结合;延伸是在耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)的作用下,合成新的DNA链。电泳技术是在同一电场下,由于蛋白质或DNA的带电性质以及本身大小、形状不同而产生不同的迁移方向或速度,从而实现样品的分离。在电泳过程中,带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

(1)PCR利用DNA的热变性原理打开DNA双链,所以其中加入的酶需具有耐高温的能力,科学家从一种Taq细菌中分离出的Taq酶,具有耐高温的能力,又可重复使用。PCR的每次循环包括变性、复性和延伸三个步骤。将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基为选择培养基。(2)电泳是指在同一电场下,由于蛋白质或DNA的带电性质以及本身大小、形状不同而产生不同的迁移方向或速度,从而实现样品的分离。正负电荷相互吸引,故在电泳过程中带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。(3)由图可知,被分析的材料属于一条DNA单链。该DNA单链含有4个碱基G,则若选择性断开的位置是碱基G,那么随机出现的被标记片段应有4种,由于4种片段的长度不同,则在电泳带上被分离的显示位置应有4处。(4)根据电泳结果,可知该单链碱基为4T、5A、5G、4C,共18个碱基,即18个核苷酸,A:T:G:C=5:4:5:4。

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