国家生活饮用水卫生标准（GB 5749—2006）规定:接种1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37℃、24h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解

国家生活饮用水卫生标准（GB 5749—2006）规定:接种1mL水样在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经37℃、24h培养后，所生长出的菌落总数不得大于100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮用水卫生标准。

回答下列问题：

（1）用无菌三角瓶取水样前，水龙头需使用酒精棉擦拭消毒后，再通过_________灭菌。取水前的无菌操作的目的是__________________。

（2）该小组通过滤膜法测定细菌总数，将10mL的水样进行过滤后，将滤膜放在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，培养时应将平板倒置，其主要原因是__________________。所用培养基中的牛肉膏除为微生物提供碳源和氮源外，还能提供磷酸盐和_________________。

（3）统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止______________。经过一段时间培养，结果如下表：

	平板1	平板2	平板3
菌落数（个）	41	35	38

据上表结果判断，所取水样测定结果_________（填“符合”或者“不符合”）饮用水的标准。

（4）该小组若想检测水样中大肠杆菌的数目，可将滤膜放在含_______培养基上，统计培养基上_____（颜色）菌落的数目。

【答案】

灼烧防止外来杂菌污染防止冷凝水滴落污染培养基维生素（“特殊营养物质”）因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目符合伊红一美蓝黑色

【解析】

无菌技术的关键是防止外来杂菌的入侵，其中灭菌比消毒效果好，但要考虑操作对象的承受能力，如活体材料、操作者的手等只能采用消毒；统计菌落数目的方法有显微镜直接计数法或间接计数法（活菌计数法），本题中涉及的计数即用活菌计数法，伊红—美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理大肠杆菌菌的代谢产物与伊红—美蓝结合，使菌落呈黑色，并有金属光泽。

（1）对水龙头的灭菌可用灼烧法；取水前的无菌操作的目的是防止外来杂菌污染，以免干扰实验结果。

（2）平板倒置后既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止冷凝水滴落培养基，造成污染，影响实验结果；培养基中的牛肉膏为微生物提供碳源、氮源、磷酸盐和维生素。

（3）不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落一般都具有稳定的特征，如菌落大小、形状、颜色等，每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，目的是为了防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的种类和数目；表格中3个平板的平均菌落数为38个，符合饮用水的标准。

（4）若要测定饮用水中大肠杆菌的数目，可将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红一美蓝培养基上培养，在该培养基上大肠杆菌的菌落会呈现黑色，可根据培养基上黑色菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。