人α1－抗胰蛋白酶（AAT）是一种重要的药用蛋白，对胰岛B细胞有免疫保护作用，AAT可通过转基因技术在羊乳中获得。流程如下：

人α1－抗胰蛋白酶（AAT）是一种重要的药用蛋白，对胰岛B细胞有免疫保护作用，AAT可通过转基因技术在羊乳中获得。流程如下：

（1）将重组表达载体导入受体细胞中，常选用受精卵作为受体细胞的原因是__________________。

（2）胚胎移植前对代孕母羊进行____________处理，目的是________________________________。胚胎发育到囊胚期，可从_____________分离出胚胎干细胞；为了维持胚胎干细胞不分化的状态，在体外培养时应_________________________________；若要鉴定胚胎的性别，具体的操作是______________________________________________。

（3）检测羊乳中是否含有AAT的技术手段是_______________。

【答案】

受精卵具有发育的全能性同期发情处理使供体和受体具有相同的生理特征内细胞团放在饲养层细胞上培养(在培养液中添加抑制分化因子)取滋养层细胞进行DNA分子性别鉴定抗原－抗体杂交

【解析】

图示是转AAT基因母羊的培育流程，其中涉及基因工程、早期胚胎培养、胚胎干细胞的获取和胚胎移植等技术的应用。其中基因工程的受体细胞之所以选择受精卵，主要是因为动物体细胞的全能性受到限制，而受精卵具有全能性最高，且细胞大、易操作等优点。在早期胚胎培养过程中若要获得胚胎干细胞，可以从培养的囊胚中内细胞团获取；若要进行胚胎的性别鉴定，常常取滋养层细胞进行DNA鉴定；在胚胎移植中，需要对接受胚胎的受体母羊进行同期发情处理，使其供体和受体具有相同的生理特征，而易于接受胚胎。最后在检测AAT是否存在时，通常采用抗原-抗体杂交技术。

（1）为培育转基因动物，常选用受精卵作为目的基因的受体细胞，是因为受精卵大，易于操作且具有发育的全能性。

（2）为了使供体和受体具有相同的生理特征，胚胎移植前对代孕母羊要进行同期发情处理。胚胎发育到囊胚期，可从囊胚内的内细胞团分离出胚胎干细胞；为了维持胚胎干细胞不分化的状态，在体外培养时应放在饲养层细胞上培养或者在培养液中添加抑制分化因子；若要鉴定胚胎的性别，应取滋养层细胞进行DNA分子性别鉴定，因为滋养层细胞与内细胞团的细胞都是同一个受精卵分裂分化来的，遗传物质一般相同。

（3）检测羊乳中是否含有AAT的原理是把AAT当作抗原，在分泌的羊乳中加入特定的抗体，观察是否会出现抗原-抗体的结合反应。若出现，说明羊乳中含有AAT，反之，则没有；这种技术手段称为抗原-抗体杂交技术。