牛羊等反刍动物可以消化秸秆，原因在于其胃部、盲肠等处有丰富的纤维素分解菌。研究人员从牛胃中筛选纤维素分解菌，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

牛羊等反刍动物可以消化秸秆，原因在于其胃部、盲肠等处有丰富的纤维素分解菌。研究人员从牛胃中筛选纤维素分解菌，并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题：

（1）研究人员采用稀释涂布平板法分离、纯化纤维素分解菌。在实验前，需要使用___________法对培养基进行灭菌；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是________________；

在样品稀释和涂布平板步骤中，下列选项不需要的是（填序号）____________。

①酒精灯 ②培养皿 ③接种环 ④无菌水 ⑤显微镜

（2）刚果红可以与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素降解产物____________发生这种反应。若研究人员在刚果红培养基平板上，发现以某种菌的菌落为中心的____________，则表明此种菌为纤维素分解菌。

（3）研究人员欲将筛选得到的纤维素分解菌进行大量培养，应选用____________培养基（填“液体”或“固体”），并以____________为唯一碳源；培养过程中应保持恒温培养箱中的温度约为__________（填“4℃”“20℃”或“35℃”），原因是____________________。

【答案】

高压蒸汽灭菌检测培养基平板是否无菌③⑤纤维二糖、葡萄糖透明圈液体纤维素35℃三个温度中，35℃最接近纤维素分解菌的生活环境（牛胄的温度），利于该菌生长繁殖

【解析】

刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入。若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。

（1）微生物培养过程中，培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。在接种前看，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，目的是检测培养基平板是否无菌；在利用稀释涂布平板法进行接种的过程中，需要使用涂布器进行接种，平板划线法接种采用接种环；菌落是肉眼可见的，不需要使用显微镜，故在样品稀释和涂布平板步骤中不需要③⑤。

（2）刚果红染色法特指纤维素的染色法，刚果红能把纤维素染成红色复合物，对纤维二糖和葡萄糖无作用，即刚果红不与纤维素降解产物纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

（3）对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基，其中的纤维素是唯一的碳源，只有纤维素分解菌可以很好地生存，其他微生物不能生存，同时振荡培养可以保证充分供氧，利于纤维素分解菌的生长，所以可以起到对纤维素分解菌的富集作用，获得大量的菌体，培养过程中应保持恒温培养箱中的温度约为35℃，其原因是三个温度中，35℃最接近纤维素分解菌的生活环境（牛胄的温度），利于该菌生长繁殖。