下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方。请回答：

下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方。请回答：

试剂	用量	试剂	用量
牛肉膏	5 g	琼脂	20 g
蛋白胨	10 g	水	1 000 mL
NaCl	5 g	——	——

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行______处理。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是____________和____________。

(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)

____________________________________________________________。

【答案】

氮源 牛肉膏和蛋白胨 灭菌 划线分离法 涂布分离法 稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染

【解析】

培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质。营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水；根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基。

（1）培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源；培养基配制完成后要调pH和灭菌；牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源。

（2）分离纯化微生物用平板划线法或稀释涂布平板法。

（3）稀释涂布平板时，稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染等原因，都会导致培养结束后，培养基上菌落连成一片。